روشی برای بهبود کارآیی استخراج DNA از نمونه خون لخته شده
منتظر شده در 1399/01/28
استخراج کارآمد و سریع DNA ژنومی با کیفیت بالا از نمونه خون لخته شده در تحقیقات ژنومی بسیار مهم است. هدف از این مطالعه ، ایجاد روش ایمن وساده ای برای پراکندگی لخته های خون توسط گلوله های فلزی بلبرینگ بود. به طور معمول ، چنین نمونه های لخته ممکن است مناسب با روش استخراجDNA معمول نیست . همچنین در مطالعه حاضر ، تحقیقات بیشتری جهت بهبود از روشهای استخراج DNA salting‐out انجام شده است. در ابتدا ، 500 میکرولیتر نمک بافر فسفات (PBS) و دو گلوله فلزی به هر لوله نمونه خون لخته شده اضافه شده و سپس در یک روتاتور آزمایشگاهی برقی به مدت 1ساعت در دمای اتاق به آرامی مورد چرخش قرار می گیرند. سپس DNA ژنومی با استفاده از روش salting‐out اصلاح شده از نمونه ها استخراج شد و یک کیت QIAamp® DNA Blood Midi اصلاح شده و با کیت QIAamp® DNA Blood Midi بعنوان کنترل مقایسه شد. ارزیابی غلظت و کیفیت DNA استخراج شده با استفاده از دستگاه اسپکتروفتومتر UV‐visible انجام شد. DNA جدا شده در برابر تقویت PCR و الکتروفورز ژل قابل تحمل بود. عملکرد و خلوص DNA بدست آمده از این سه روش به طور معنی داری متفاوت بود. پیشنهاد ما روش نمکی تغییر داده شده برای استفاده ساده و کارآمد جداسازی DNA از نمونه های لخته خون قدیمی است .استفاده از این روش هم آسان است و هم کم هزینه در کارهای آزمایشگاهی معمول است.